معرف متیل رد
متیل رد یک رنگ آزو یا رنگ مصنوعی است که یکی از شاخصهای شیمیایی (اندیکاتور) رایج است که در آزمایشگاه برای تعیین تغییرات pH در یک محدوده خاص استفاده میشود و بین pH 4.4 و pH 6.2 بیشترین کاربرد را دارد.
اگر سطح pH زیر 4.4 باشد، رنگ آن قرمز است و اگر بالاتر از 6.2 باشد، رنگ آن زرد میشود. اگر PH بین این دو حد باشد، رنگ نارنجی است. این تغییر رنگ همچنین با میزان جدا شدن پروتونها یا یونهای هیدرونیوم (H+) از مولکولهای رنگ ارتباط دارد.
متیلن رد برای آزمایش تغییرات pH در محلولهای اسیدی مفید است. همچنین برای کالیبره کردن محلولها، بهویژه در طول آزمایشهای تیتراسیون مفید است. با این حال، برای آزمایش تغییرات pH در محلولهای قلیایی مؤثر نیست، زیرا در صورت مخلوط شدن با آنها، زرد رنگ باقی میماند.
متیل رد برای چه مواردی استفاده میشود؟
رنگهای آزو ارزش تجاری مهمی بهعنوان رنگ برای منسوجات، محصولات چرمی و برخی از محصولات غذایی دارند.
جدا از آزمایشهای معمول تیتراسیون آزمایشگاهی، متیل رد در میکروبیولوژی نیز استفاده میشود و میتواند باکتریهایی را که از طریق تخمیر اسیدی مخلوط گلوکز تولید اسیدهای پایدار میکنند، شناسایی کند.
این آزمایش باکتریهای رودهای را بر اساس الگوی متابولیسم گلوکز شناسایی میکند. باکتریهای رودهای از نظر بالینی مهم هستند زیرا بیماری زا هستند، سالمونلا و E. coli از رایجترین باکتریهایی هستند که برای انسان بیماری ایجاد میکنند. انتریکها یا باکتریهایی که متعلق به خانواده انتروباکتریاسه هستند دارای مسیرهای متابولیک گلوکز هستند که در ابتدا اسید پیروویک تولید میکنند. مسیر اسید مخلوط توسط برخی از انتریکها برای تبدیل اسید پیروویک به انواع دیگر اسیدها مانند اسید لاکتیک، اسید استیک و اسید فرمیک استفاده میشود.
متیل رد را میتوان برای شناسایی این باکتریها بر اساس محصولات جانبی متابولیک اسیدی آنها استفاده کرد. بنابراین، آنها را باکتری متیل رد مثبت مینامند و این اصطلاح شامل مواردی مانند E. coli و P. vulgaris میشود. از سوی دیگر، باکتریهای متیل رد منفی مانند S. marcescens و E. aerogenes از مسیر بوتیلن گلیکول برای تبدیل اسید پیروویک به محصولات جانبی متابولیک خنثی استفاده میکنند.
وضعیت ظاهری: پودر قرمز تیره تا قرمز بنفش
چگالی: ۷۹۱/۰ گرم بر سانتیمتر مکعب
نقطه ذوب: ۱۸۲-۱۷۹ درجه سانتیگراد
حلالیت: محلول در اتانول
کشت ایزولهای که با استفاده از یک حلقه انتقال (لوپ) استریل به یک لوله تلقیح میشود.
مرحله دوم این است که لوله را در دمای 35 درجه سانتیگراد به مدت دو تا پنج روز انکوبه کنید.
سپس، محیط انکوبه شده به لوله دیگری منتقل میشود.
در نهایت، پنج قطره متیل رد به محیط اضافه میشود.
سپس مخلوط به آرامی بچرخانید تا اطمینان حاصل شود که نشانگر به درستی پراکنده شده است.
هنگامی که متیل رد بهدرستی در محیط پخش شد، اگر PH زیر 4.4انتظار میرود باشد قرمز شود. وجود اسید پیروویک که به اسیدهای دیگر با PH حداقل 4.2 متابولیزه میشود، نتایج آزمایش مثبت را برای حضور انتریکهای بیماری زا مانند اشریشیا کلی ایجاد میکند. از طرف دیگر، اگر سطح pH محیط فقط 6.0 باشد، نتیجه آزمایش منفی است و رنگ نشانگر زرد خواهد بود.
متیل رد در میکروبیولوژی برای شناسایی باکتریهای رودهای مانند E.Coli استفاده میشود.
تیتراسیون فرآیند افزودن آهسته محلولی با غلظت مشخص و حجم شناخته شده (تیتر کننده) به محلولی با غلظت نامعلوم و حجم شناخته شده (آنالیت) است. این کار تا زمانی انجام میشود که غلظت آستانه به دست آید، که با تغییر رنگ یک نشانگر، مانند متیل رد، تعیین میشود. معمولاً تغییر رنگ نشاندهنده خنثیسازی است، اما بسته به آزمایش میتواند به معنای رسیدن به آستانه مورد نظر نیز باشد.
چهار نوع روش تیتراسیون به عنوان ابزار تحلیلی برای تعیین غلظت مجهول یک محلول توسعه یافته است. آنالیت از گونههای شیمیایی شناخته شده ای است که با تیتران(محلولی که تیتراسیون با آن انجام میشود) واکنش میدهد. چهار دسته از تیتراسیون عبارتند از:
- تیتراسیون اسید و باز
- تیتراسیون های ردوکس
- تیتراسیون بارش
- تیتراسیون های کمپلکسومتری
- حساسیت زا و التهاب آور (محرک)
- سمی و محرک
- اشتعال پذیر
