محلول رنگ EA50 سورینا طب آزما
Papanicolaou's solution EA 50(Eosin Azure)
محلول پاپانیکولائو چیست؟
رنگآمیزی پاپانیکولائو، از تکنیک‌های رنگآمیزی بافت‌شناسی است که توسط جورج پاپانیکولائو، ابداع و تکمیل شده است. روش رنگآمیزی پاپانیکولائو از پراستفاده‌ترین رنگ آمیزی‌ها در سیتولوژی است.
از این شیوه در تشخیص و تمایز سلولها در ترشحات مختلف بدن استفاده می‌شود. نمونه‌ها می‌توانند اسمیر زنان (پاپ اسمیر)، خلط، بزاق، ادرار، مایع نخاع، مایع شکمی، مایع جنب، مایع سینوویال، مایع منی، مواد آسپیراسیون، نمونه‌های لمس تومور، یا سایر مواد حاوی سلول باشند.
رنگآمیزی پاپ یک روشی مطمئن خصوصاً در شناسایی سرطان دهانه رحم در زنان محسوب می‌گردد. این روش به پاپ اسمیر نیز مشهور است.
محلول رنگ EA50 چیست؟
- محلول رنگآمیزی EA50 که به نام محلول پاپانیکولائو EA50 نیز شناخته می‌شود، مناسب رنگآمیزی اجزای سلولی می‌باشد.
- محلول EA50 از دو رنگ ائوزین و لایت گرین تشکیل شده که در سیستم رنگآمیزی پاپانیکولائو با هدف یکسان رقابت می‌کنند، در نتیجه باعث رنگآمیزی متفاوت سلولها در چرخه رنگآمیزی است.
- رنگآمیزی به منظور تشخیص انواع سرطان‌ها مانند سرطان رحم، سرطان دهانه رحم و …
- رنگآمیزی انواع ترشحات، سلولها (سیتوپلاسم سلول)
- ابتدا لام‌های مربوط به نمونه‌های سیتولوژی را در 3 ظرف گزیلول (هر کدام به مدت 20 دقیقه) قرار می‌دهیم.
- سپس آن‌ها را در الکل 96 درجه حداقل به مدت 30 دقیقه قرار داده تا کاملا فیکس شوند.
- سپس نمونه‌ها را به ترتیب 10 بار به الکل 80 درجه و 10 بار به الکل 70 درجه وارد و خارج کرده و بعد با آب شستشو می‌دهیم.
- ابتدا نمونه‌ها را به مدت 5 دقیقه در رنگ هماتوکسین که رنگ مخصوص هسته است، قرار می‌دهیم.
- لام‌ها را با آب قلیایی یا آب شهری بدون کلر شستشو می‌دهیم.
- لام‌ها را یک بار وارد محلول اسید الکل می‌کنیم تا رنگ هماتوکسین سیتوپلاسم از بین برود. سپس آن‌ها را دوباره شستشو می‌دهیم. بعد لام‌ها را 3 بار وارد محلول کربنات لیتیم می‌کنیم تا رنگ هسته فیکس شود سپس با آب لام‌ها را شستشو می‌دهیم.
- لام‌ها را به تعداد 10 بار وارد الکل 96 درجه می‌کنیم. بعد به مدت 4 دقیقه نمونه‌ها را در محلول رنگی Orange (OG6) قرار می‌دهیم.
- سپس نمونه‌ها را 2 بار در الکل 96 درجه وارد کرده و بعد به مدت 5 دقیقه در رنگ EA50 قرار می‌دهیم.
- در مرحله آبگیری، 2 ظرف حاوی الکل 96 درجه و دو ظرف حاوی الکل مطلق و 3 ظرف حاوی گزیلول تهیه کرده و لام‌ها را به ترتیب وارد ظروف حاوی الکل با درجه پایین، الکل با درجه بالا و گزیلول می‌کنیم .
- پس از رنگآمیزی لام‌ها بر روی آن‌ها چسبی به نام Canad Bond می‌ریزیم. سپس بوسیله لام مقداری گزیلول برداشته و لامل را بر روی آن قرار می‌دهیم. در هنگام گذاشتن لامل باید دقت کنیم که حبابی ایجاد نشود.
- رنگ ائوزین درEA50، سیتوپلاسم سلول‌های سنگفرشی بالغ، هستک، مژه و سلول‌های قرمز خون را به رنگ صورتی در می‌آورد.
- لایت گرین درEA50، سیتوپلاسم سلول‌های متابولیکی فعال مانند سلول‌های سنگفرشی بازل، سلوهای سنگفرشی متوسط و سلول‌های ستونی را به رنگ آبی در می‌آورد.
- بیسمارک قهوه‌ای در این فرمولاسیون به عنوان پایدارکننده استفاده می‌شود و هیچ‌گونه اثر رنگی ندارد و در برخی فرمولاسیون آن را حذف می‌کنند.
- دمای نگهداری 15 تا 25 درجه سانتی‌گراد
- مقدار انحلال‌پذیری در آب 20 درجه سانتی‌گراد (کاملاً انحلال‌پذیر)
- نقطه اشتعال 17 درجه سانتی‌گراد
تفسیر محلول رنگ EA50 سورینا طب آزما
- هسته: آبی
- سلول‌های کراتین بالا: نارنجی
- سلول‌های سطحی: صورتی
- اریتروسیت: صورتی تیره
- سلول‌های پاراباسال: آبی/سبز
- سلول‌های واسطه: آبی/سبز
- سلول‌های متابلاستی: ممکن است شامل هر دو آبی / سبز و صورتی
- قارچ کاندیدا در نمونه هدف قرمز رنگ آمیزی می شود.
- تریکوموناس (Trichomonas) به رنگ سبز یا خاکستری قابل مشاهده است
رنگ آمیزی پاپ اسمیر سلول های Intermediate سنگفرشی غیرنرمال را با بزرگ شدن هسته و هیپرکرومازی خفیف با بزرگنمایی 400 برابر میکروسکوپ نوری نشان می دهد.
سوالات متداول
- رنگآمیزی پاپ اسمیر عمدتا برای تشخیص کدام سرطان استفاده می‌شود؟ سرطان دهانه رحم
- نام دیگر رنگآمیزی پاپ اسمیر چیست؟ با نام‌های رنگآمیزی پاپ یا پاپانیکولائو نیز شناخته شده است.
- چند رنگ در پروتکل رنگآمیزی پاپ اسمیر استفاده می‌شود؟ از رنگ‌های هماتوکسیلین، اورنج G و ائوزین آزور در رنگآمیزی پاپ اسمیر استفاده می‌شود.
