محلول رنگ OG6 سورینا طب آزما
Papanicolaou's solution OG6 (Orange G solution)
محلول پاپانیکولائو چیست؟
رنگ‌آمیزی پاپانیکولائو، از تکنیک‌های رنگ‌آمیزی بافت‌شناسی است که توسط جورج پاپانیکولائو، ابداع و تکمیل شده است. روش رنگ‌آمیزی پاپانیکولائو از پراستفاده‌ترین رنگ آمیزی‌ها در سیتولوژی است.
از این شیوه در تشخیص و تمایز سلول‌ها در ترشحات مختلف بدن استفاده می‌شود. نمونه‌ها می‌توانند اسمیر زنان (پاپ اسمیر)، خلط، بزاق، ادرار، مایع نخاع، مایع شکمی، مایع جنب، مایع سینوویال، مایع منی، مواد آسپیراسیون، نمونه‌های لمس تومور، یا سایر مواد حاوی سلول باشند.
رنگ‌آمیزی پاپ یک روشی مطمئن خصوصاً در شناسایی سرطان دهانه رحم در زنان محسوب می‌گردد. این روش به پاپ اسمیر نیز مشهور است.
محلول رنگ OG6 چیست؟
یکی از انواع محلول پاپانیکلائو، محلول رنگ OG6است که معمولاً به فرم نمک سدیمی و به‌صورت پودر یا کریستال‌های نارنجی‌رنگ وجود دارد از همین رو به اورنج جی معروف شده است.
در روش رنگ‌آمیزی پاپ، به پنج لکه و سه‌راه حل تقسیم می‌گردد. محلول رنگ OG6 یکی از این شیوه‌هاست و حاوی نارنجی G در الکل اتیل ۹۵٪ با مقدار کمی اسید فسفاتوتونگستیک است. در این محلول OG نشان‌دهنده نارنجی و «۶» نشان‌دهنده غلظت اسید فسفوتونگستیک اضافه شده است. انواع دیگری نظیر OG5 و OG8 نیز کاربرد دارد.
- در رنگ آمیزی پاپانیکلائو
- استفاده به‌عنوان یک شناساگر شیمیایی اسید و باز است.
- رنگ‌آمیزی کراتین
- رنگ‌آمیزی تری کروم، با دیگر رنگ‌های زرد ترکیب‌شده
- رنگ‌آمیزی اریتروسیت‌ها
- رنگ OG6 در سیتولوژی جهت رنگ‌آمیزی سیتوپلاسم سلول‌ها استفاده می‌شود.
- ابتدا لام‌های مربوط به نمونه‌های سیتولوژی را در 3 ظرف گزیلول (هر کدام به مدت 20 دقیقه) قرار می‌دهیم.
- سپس آن‌ها را در الکل 96 درجه حداقل به مدت 30 دقیقه قرار داده تا کاملا فیکس شوند.
- سپس نمونه‌ها را به ترتیب 10 بار به الکل 80 درجه و 10 بار به الکل 70 درجه وارد و خارج کرده و بعد با آب شستشو می‌دهیم.
- ابتدا نمونه‌ها را به مدت 5 دقیقه در رنگ هماتوکسین که رنگ مخصوص هسته است، قرار می‌دهیم.
- لام‌ها را با آب قلیایی یا آب شهری بدون کلر شستشو می‌دهیم.
- لام‌ها را یک بار وارد محلول اسید الکل می‌کنیم تا رنگ هماتوکسین سیتوپلاسم از بین برود. سپس آن‌ها را دوباره شستشو می‌دهیم. بعد لام‌ها را 3 بار وارد محلول کربنات لیتیم می‌کنیم تا رنگ هسته فیکس شود سپس با آب لام‌ها را شستشو می‌دهیم.
- لام‌ها را به تعداد 10 بار وارد الکل 96 درجه می‌کنیم. بعد به مدت 4 دقیقه نمونه‌ها را در محلول رنگی Orange (OG6) قرار می‌دهیم.
- سپس نمونه‌ها را 2 بار در الکل 96 درجه وارد کرده و بعد به مدت 5 دقیقه در رنگ EA50 قرار می‌دهیم.
- در مرحله آبگیری، 2 ظرف حاوی الکل 96 درجه و دو ظرف حاوی الکل مطلق و 3 ظرف حاوی گزیلول تهیه کرده و لام‌ها را به ترتیب وارد ظروف حاوی الکل با درجه پایین، الکل با درجه بالا و گزیلول می‌کنیم .
- پس از رنگ‌آمیزی لام‌ها بر روی آن‌ها چسبی به نام Canad Bond می‌ریزیم. سپس بوسیله لام مقداری گزیلول برداشته و لامل را بر روی آن قرار می‌دهیم. در هنگام گذاشتن لامل باید دقت کنیم که حبابی ایجاد نشود.
تفسیر محلول رنگ OG6 سورینا طب آزما
- هسته: آبی
- سلول‌های کراتین بالا: نارنجی
- سلول‌های سطحی: صورتی
- Erythrocytes :صورتی تیره
- سلول‌های پاراباسال: آبی/سبز
- سلول‌های واسطه: آبی/سبز
- سلول‌های متابلاستی: ممکن است شامل هر دو آبی / سبز و صورتی
- قارچ کاندیدا در نمونه هدف قرمز رنگ آمیزی می شود.
- تریکوموناس (Trichomonas) به رنگ سبز یا خاکستری قابل مشاهده است
نکات تکمیلی محصول
- دمای نگهداری 15 تا 25 درجه سانتی‌گراد
- مقدار انحلال‌پذیری در آب 20 درجه سانتی‌گراد (کاملاً انحلال‌پذیر)
- نقطه اشتعال 17 درجه سانتی‌گراد
رنگ آمیزی پاپ اسمیر سلول های Intermediate سنگفرشی غیرنرمال را با بزرگ شدن هسته و هیپرکرومازی خفیف با بزرگنمایی 400 برابر میکروسکوپ نوری نشان می دهد.
سوالات متداول
- رنگ‌آمیزی پاپ اسمیر عمدتا برای تشخیص کدام سرطان استفاده می‌شود؟ سرطان دهانه رحم
- نام دیگر رنگ‌آمیزی پاپ اسمیر چیست؟ با نام‌های رنگ‌آمیزی پاپ یا پاپانیکولائو نیز شناخته شده است.
- چند رنگ در پروتکل رنگ‌آمیزی پاپ اسمیر استفاده می‌شود؟ از رنگ‌های هماتوکسیلین، اورنج G و ائوزین آزور در رنگ‌آمیزی پاپ اسمیر استفاده می‌شود.
